众所周知 ， 不同分子量的透明质酸钠可精准作用于皮肤表面、表皮、真皮发挥立体保湿功效 。
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化妆品级透明质酸钠分子量在200万Da以上一般以储水保湿、抵挡紫外线等为主；120-160万Da是最常用、性价比最高的透明质酸钠；20-40万Da是在常规分子量基础上通过酶解降低其分子量 ， 增加其流动性 ， 使其在精华液中发挥更好的保湿效果；分子量1万Da以内的可以深入皮肤角质层 ， 达到深层补水的功能；有研究表明4-6个透明质酸钠双糖结构的片段具有激活机体免疫 ， 修复皮肤的功效[1] 。
作为机体大分子多糖 ， 透明质酸钠具有物理性质及生物活性 。 在化妆品中 ， 大家对透明质酸钠的认识目前还主要为其物理性质：物理填充 ， 成膜防护、补水保湿 。 本文通过对山东众山生物科技有限公司（以下简称“众山生物”）独有专利技术研发生产的小分子透明质酸钠——HYDHYA?致修（分子量＜10kDa）在抗炎、舒敏、修复方面的研究测试 ， 挖掘透明质酸钠的生物活性 。
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HYDHYA?致修是众山生物通过独有专利技术（CN112662781A）研发生产的小分子透明质酸钠 ， 又称寡聚透明质酸钠 。
本发明使用生物降解法-酶解法制备小分子透明质酸钠：在发酵过程中加入透明质酸水解酶 ， 边发酵边酶解 ， 得到固定分子量的寡聚透明质酸钠；高温灭活过程中加入抗氧化剂保护透明质酸钠 。 该方法提高了发酵产量 ， 酶解后透明质酸钠的吸收率高、工艺连续 ， 直接获得目标分子量产物 ， 所得产品活性高 。
酶解法生产的优点
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为了研究透明质酸钠的舒敏、抗炎、修复功效 ， 采用C48/80刺激肥大细胞模型 ， 通过肥大细胞脱颗粒的形态学观察和脱颗粒率来评价其舒敏功效；选用UVB刺激角质形成细胞建立皮肤炎症损伤体外模型 ， 通过检测炎症因子TNF-α、IL-1α表达情况来评价其抗炎功效；将透明质酸钠均匀涂布于实验构建的“SLS-Epikutis”皮肤刺激性损伤模型表面以模拟人体使用过程 ， 通过检测模型组织形态学结构变化及屏障相关蛋白 ， 评价其促进“SLS-Epikutis”刺激性损伤模型屏障修复的功效 。
舒敏功效检测
采用C48/80刺激肥大细胞模型 ， 通过肥大细胞脱颗粒的形态学观察和脱颗粒率来评价样品的舒敏功效 。
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图1 肥大细胞脱颗粒率柱形图
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图2 肥大细胞脱颗粒的形态学观察
与BC组相比 ， NC组肥大细胞脱颗粒率显著上升 ， 说明本次实验C48/80刺激条件有效；与NC组相比 ， PC（色甘酸钠）组肥大细胞脱颗粒现象被显著抑制 ， 说明本次实验有效；与NC组相比 ， HYDHYA?致修组肥大细胞脱颗粒率显著下降 ， 表明HYDHYA?致修具有舒敏功效 。
抗炎功效检测
【功效水解小分子透明质酸钠-舒敏抗炎修复效果研究】选用UVB刺激角质形成细胞建立皮肤炎症损伤体外模型 ， 通过检测炎症因子TNFα、IL-1α表达情况来评价样品的抗炎功效 。
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图3 炎症因子TNFα、IL-1α含量统计图
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