3.磁珠免疫法
外泌体表面有其特异性标记物(如CD9 , CD81 , CD63 , CD82 , Hsp70 , Ras相关蛋白Rab-5b , 细胞骨架蛋白肌动蛋白和TSG101等) , 用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合 , 即可将外泌体吸附并分离出来 。 因为外泌体的异质性与它们的起源一致 , 不同外泌体上的标记物丰度也不同 , 通过特定的抗体组合可以从样本中捕获不同类型的外泌体 , 进行选择性分离 。
磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点 , 但是效率低 , 外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响 , 不利于下游实验 , 难以广泛普及 。
4.PEG-base沉淀法
聚乙二醇(PEG)可与疏水性蛋白和脂质分子结合共沉淀 , 早期应用于从血清等样本中收集病毒 , 现在也被用来沉淀外泌体 , 其原理可能与竞争性结合游离水分子有关 。 在4℃利用PEG孵育后通过过滤或离心即可沉淀、回收外泌体 。
【方法美容护肤界的新兴明星-外泌体】采用此种分离方法也存在不少问题:纯度和回收率低 , 杂蛋白较多(假阳性) , 颗粒大小不均一 , 产生难以去除的聚合物 , 机械力或者吐温-20等化学添加物将会破坏外泌体等 , 因此发表文章时易受质疑 。
5.其他方法(文献报道)
①交流电动(alternating current electrokinetic , ACE)微阵列芯片装置:简称ACE芯片 , 该芯片的单个电极的侧视图和俯视图如下所示 , 一个设备中有超过1000个电极 , 其表面涂覆薄薄一层多孔水凝胶 , 图中虚线所示DEP高场区即外泌体被富集的位置 。 在芯片电极处被富集的外泌体可直接用扫描电子显微镜(SEM)和免疫荧光等方法进行分析与鉴定 。
该装置可以从未稀释的人血浆样品中快速分离获取外泌体 , 需要的样品量小 , 在15分钟内将外泌体集中到微电极周围的高场区域 。 洗涤去除大量血浆物质后 , 使外泌体浓缩在微电极上 。 分离、洗涤及芯片荧光分析步骤在30分钟内就可以完成 。
参考文献:
Ibsen SD, Wright J, Lewis JM, et al. Rapid Isolation and Detection of Exosomes and Associated Biomarkers from Plasma[J]. ACS nano, 2017.
6.外泌体可促进细胞再生 。
外泌体可以有效刺激受体细胞 , 释放细胞活力 , 促进其再生和新生 。 因而可以帮助淡化祛除斑点 , 促使肌肤光亮细腻 。
7. 外泌体可修复受损细胞
外泌体外泌体可以加速I型胶原和III型胶原的基因表达 , 促进成纤维细胞增殖、胶原合成 , 从而让帮助修复受损的肌肤屏障 。 而且它可以提高受损部位的修复能力和愈合能力 。
8. 外泌体可抑制炎症产生 。
外泌体可以诱导巨噬细胞向M2型极化 , 从而降低了巨噬细胞诱发炎症反应的能力 , 从而抑制炎症 。 我们肌肤的很多问题都与肌底炎症有关 , 而外泌体可以通过抑制炎症来让肌肤从内而外的健康起来 。
干细胞疗法围绕使用完整细胞来替代丢失的组织 。 相反 , 外泌体是与细胞分离的囊泡 。 外泌体促进恢复青春活力的方式是利用外泌体中携带的有效成分来帮助其他细胞 。
干细胞和外泌体的另一个主要区别是前者仅从身体的特定部位获得 , 例如:骨髓、血液、脂肪组织 。 而外泌体 , 可以从几乎所有类型的细胞中获得 。 胎盘中也含有大量的外泌体 。
文章图片
(外泌体与干细胞的不同)
通过上述科普 , 大家对外泌体美容一定有了更全面的认识 。
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