经验总结

  1. 首页 > 生活杂烩 > 美容减肥 > >

黄芩甙对白三烯B4引起的银屑病患者中性粒细胞趋化反应的影响

生活百科黄芩甙

中草药黄芩为清热燥湿药，其主要成分为黄芩甙 。现代研究表明：黄芩甙有广谱抗菌、抗炎与抗变态反应作用 。我们应用琼脂糖玻片法证实：黄芩甙对白三烯b４(ltb４)引起的银屑病患者中性粒细胞(pmn)趋化反应有抑制作用，从而为黄芩甙治疗银屑病提供了理论依据 。

黄芩甙对白三烯B4引起的银屑病患者中性粒细胞趋化反应的影响

文章插图
一、材料和方法
(一)病例：寻常型银屑病患者20例，男11例，女9例；年龄17～55岁，平均33岁；总病期7天至15年，平均5年 。现病期(复发或新发疹时间)7天至3个月 。健康对照组20例，男10例，女10例；年龄20～45岁，平均30岁 。所有受试对象在实验前2周内未用任何其它药物 。
(二)主要试剂及设备：人淋巴细胞分离液(lsm)：上海试剂二厂 。dextran t500：瑞士pharmacia公司产品 。琼脂糖(agarose)：日本进口，上海化学试剂采购供应站分装厂 。dmem培养基：法国life technologies公司产品 。ltb４标准品(5ng/ml)：美国sigma公司产品 。血小板活化因子(paf)标准品(10-7mol/l)：法
表1　不同浓度黄芩甙对ltb４引起的pmn趋化反应(抑制率%)的影响(±s)
组　别例数 黄 芩 甙 浓 度5μg/ml10μg/ml15μg/ml20μg/ml银屑病组2026.8±1.42944.3±1.41264.6±1.54077.9±1.624健康对照组2025.6±1.45545.0±1.42063.8±1.52478.0±1.690t值-0.89990.43170.78660.7240p值-＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05
注：孵育时间为2小时
表2　黄芩甙对不同趋化因子引起的pmn趋化反应(抑制率%)的影响(±s)
趋化因子 黄 芩 甙 浓 度5μg/ml10μg/ml15μg/ml20μg/mlltb４26.8±1.42944.3±1.41264.9±1.54577.9±1.624paf2.58±0.022.56±0.052.56±0.052.57±0.03t值82.79468.63778.56084.284p值＜0.01＜0.01＜0.01＜0.01
注：孵育时间为2小时
表3　不同孵育时间黄芩甙对ltb４引起的pmn趋化反应(抑制率%)的影响(±s)
组　别例数 孵 育 时 间30分钟1小时2小时18小时银屑病组2015.3±1.36528.3±1.38044.3±1.40262.5±1.526健康对照组2014.6±1.34726.9±1.36545.0±1.42062.6±1.580t值-0.62400.82640.43170.7625p值-＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05
注：黄芩甙浓度为20μg/ml国巴黎大学benvenist教授赠送 。黄芩甙粉剂：第二军医大学植化教研室廖时萱教授制备及赠送 。不锈钢打孔器：自制，孔径为2.4mm 。
(三)方法：
1.pmn的分离与制备：分离后制成的细胞悬液，计数为2.5×10５细胞/ml 。
2.琼脂糖凝胶板的制备：将琼脂糖液均匀平铺于76mm×26mm的灭菌载玻片上，水平放置，用孔径为2.4mm不锈钢打孔器，打孔6列，每列为一组，每组又分为外、中、内3孔 。
3.pmn移行的测定方法：①实验组4列的中孔中分别向每毫升白细胞悬浮液中添加5μg、10μg、15μg、20μg黄芩甙，对照组2列的中孔中为不加任何药物的白细胞悬浮液 。②6列的外孔中均加ltb４或paf溶液作为趋化因子，内孔均加dmem培养液作为对照 。③将加入上述药物的玻片放入37℃孵箱中分别培养0.5小时、1小时、2小时、18小时 。④取出玻片，待孔中液体干燥后，先后在玻片上加纯甲醇和37%缓冲福尔马林液各3ml，30分钟以中断细胞移行，完整地去除琼脂糖胶，待玻片细胞干燥后，用wright染色在显微镜下用显微测微尺测量玻片上pmn趋化移行和随机移行的距离 。⑤依下式计算趋化移行和随机移行的抑制率：
抑制率=(实验组距离-对照组距离)/(对照组距离)×100%
4.统计学方法：采用两样本均数的t检验 。
二、结果
不同浓度的黄芩甙分别与pmn孵育2小时，能明显抑制ltb４对pmn的趋化反应，与黄芩甙的浓度呈剂量依赖关系(表1) 。黄芩甙对daf引起的pmn趋化反应则无明显影响(表2) 。
黄芩甙(20μg/ml)分别与pmn孵育30分钟、1小时、2小时、18小时后对ltb４引起的pmn趋化反应的抑制作用逐渐增加，24小时后抑制作用不再增加(表3) 。

经验总结扩展阅读


上一篇：眼球是由哪些组织构成的

下一篇：拨开迷雾给十个美丽方法拨乱反正