大疱性类天疱疮（bp）、线状iga大疱病（labd）、获得性大疱性表皮松解症（eba）和大疱性系统性红斑狼（bsle）等疾病是一组自身免疫性表皮下大疱病 。目前普遍认为 ， iga型抗体线状沉积于基底膜带（bmz）是labd的特征 。近来研究发现bp、eba和bsle等亦存在iga型基底膜带抗体（bmz-ab）[1] ， 因此我们应用免疫印迹法对这组疾病的iga型和igg型bmz-ab进行分析 。
文章插图
一、材料和方法
1．患者血清：bp63例 ， 男37例 ， 女26例 ， 平均年龄为57岁（34～81岁）；labd19例 ， 其中成人型14例 ， 男6例 ， 女8例 ， 平均年龄为36岁（17～69岁） ， 儿童型5例 ， 男3例 ， 女2例 ， 平均年龄6岁（2～12岁）；eba6例 ， 均为男性 ， 平均年龄为13.5岁(1～26岁);bsle5例 ， 男1例 ， 女4例 ， 平均年龄23.5岁(17～32岁) 。以上病例均根据临床表现、组织病理、直接免疫荧光、盐裂皮肤直接免疫荧光、盐裂皮肤间接免疫荧光检查的结果诊断 。正常人对照组16例 ， 男8例 ， 女8例 ， 平均年龄35岁（19～55岁） 。
2.热分离法制备表皮下大疱病抗原和免疫印迹：按前文方法[2]进行 ， 简言之 ， 外科手术切除下来的正常皮肤 ， 56℃热分离为表皮和真皮 ， 表皮充分匀浆并经液氮反复冻融3次 ， 离心提取为表皮抗原提取液；真皮经8mol/l尿素浸泡后离心提取为真皮抗原液 。表皮或真皮抗原液经sds-page和转移电泳 ， 将抗原转印至硝酸纤维膜（nc）上 。nc封闭后与患者或对照血清反应1h ， 反复洗涤 ， 与辣根过氧化物酶标记的兔抗人igg和iga抗体反应1h ， 反复洗涤 ， 加入dab底物液显色 。
二、结果
1.bp血清：63例bp患者中49例（77.8％）血清中有igg型bmz-ab ， 分别与表皮抗原液中230000、200000、180000、165000、130000、115000和97000抗原结合 ， 其中15例（23.8％）bp血清中同时伴有iga型bmz-ab ， 分别与230000、180000、165000、115000和97000表皮抗原相结合 。
2.labd血清：19例labd患者中15例（78.9％）血清中有iga型bmz-ab ， 结合表皮抗原液中115000和97000抗原 ， 其中6例（40％）不仅有iga型bmz-ab ， 同时伴有结合230000、165000、115000和97000表皮抗原的igg型bmz-ab 。
3.eba血清：6例eba患者中3例血清中同时出现结合真皮抗原液中290000抗原的igg型和iga型bmz-ab 。
4.bsle血清：5例bsle患者中3例血清中igg型bmz-ab结合真皮抗原液中290000抗原 ， 其中2例伴有结合290000真皮抗原的iga型bmz-ab 。
5.对照：正常人血清不与表皮抗原液和真皮抗原液发生反应 。
三、讨论
本文结果显示 ， bp血清中不仅存在结合230000、200000、180000、165000、130000、115000和97000表皮抗原的igg型bmz-ab ， 而且在23.8％的bp血清中也分别或同时存在结合230000、180000、115000和97000表皮抗原的iga型bmz-ab 。eba和bsle血清中不仅存在结合290000真皮抗原的igg型bmz-ab ， 也有部分患者血清中存在结合290000真皮抗原的iga型bmz-ab 。反之 ， 在labd血清中 ， 不仅存在结合115000、97000表皮抗原的iga型bmz-ab ， 而且在40％的iga型bmz-ab阳性的labd血清中分别或同时检出结合230000、165000、115000和97000表皮抗原的igg型bmz-ab 。以上结果提示 ， 在bp、labd、eba和bsle中均可同时存在iga型和igg型bmz-ab 。此外 ， bp和labdiga型bmz-ab结合的靶抗原有部分相同 ， 如115000、97000表皮抗原 。labd中也存在结合230000、165000、115000和97000表皮抗原的igg型bmz-ab ， 与bp部分相同 。我们的研究结果证实了部分文献报道[3 ， 4] 。由于bp和labd中igg型和iga型bmz-ab均结合97000表皮抗原 。因此 ， 97000表皮抗原并非是过去一直认为的labd特异性靶抗原 。因此我们认为本文这组labd可能属于bp的一种临床类型——iga型bp 。
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