【季节性接触性皮炎花粉斑贴试验阳性部位皮肤IgE检测】 最近研究表明 ， 在季节性接触性皮炎患者中进行花粉斑贴试验［1］或皮肤划痕试验［2 ， 3］呈阳性湿疹样过敏反应 。季节性接触性皮炎患者血清总ige水平、花粉变应原特异性ige阳性率均高于非季节性变态反应性接触性皮炎［1］ 。为了观察季节性接触性皮炎局部皮损中ige状况 ， 我们利用花粉变应原行斑贴试验 。对阳性过敏反应部位进行免疫组化检查 ， 结果报道如下 。
文章插图
一、病例和方法
(一)临床资料：①季节性接触性皮炎：诊断标准见文献［1］ 。符合上述标准的季节性接触性皮炎患者5例(女3例 ， 男2例) 。经本人同意在花粉变应原(豚草、法梧、黄蒿和藜草各1例)阳性过敏斑试部位进行活检 。②非季节性接触性皮炎(变态反应接触性皮炎)7例(女3例 ， 男4例) ， 部位包括头、面、手和手臂 。经本人同意在标准筛选抗原(硫酸镍、硫柳汞、环氧树脂各1例 ， 卡巴混合物、芳香混合物各2例)阳性过敏斑试部位进行活检 。③正常对照：无接触性皮炎、湿疹史 ， 无特应性家族史 ， 无寄生虫感染史的2例健康者分别在背部和面部活检 。所有受试者在受试前2周及其研究过程中均未用皮质类固醇激素、抗组胺药 。
(二)方法：
1.常规斑贴试验(简称斑试)：用我科研制的一套20种标准筛选系列抗原及斑试器 ， 对临床诊断接触性皮炎进行常规斑试 ， 斑试操作方法按国际通用方法 ， 判断标准以国际接触性皮炎研究组规定的标准为依据 ， 观察时间为斑试后48小时、72小时和96小时［4］ 。
2.花粉变应原斑试：临床诊断季节性接触性皮炎用花粉(徐州市变态反应研究中心提供的脱脂花粉)行斑试 。种类为豚草、法梧、藜草、?草、黄蒿、早春、晚春和夏秋 。其中早春、晚春和夏秋为多价花粉［5］ 。方法：用胶带粘贴背部皮肤3次 ， 分别将8种脱脂花粉100μg放入各斑试小室内 ， 然后加入40μl的人工汗液(氯化钠3g、乳酸2ml、硫酸钠1g、尿素2g、硬脂酸2ml ， 加入蒸馏水使总量成为1l) 。设人工汗液作阴性对照 。贴于上背部 ， 密封48小时后除去斑试物 ， 隔30分钟观察结果 。判断标准：红斑为(+)；红斑、丘疹为(++)；红斑、丘疹和水疱为(+++) 。
3.病理及免疫组化检查：斑试48小时后 ， 在利多卡因局麻下活检阳性过敏斑试部位的组织 。分为2份 ， 1份为常规病理 ， 行he染色 ， 另1份oct包埋 ， 液氮中速冻 ， 贮存于-70℃冰箱中备用 。采用abc(亲和素-生物素-过氧化物酶复合物)技术 。abc试剂盒购自美国vector公司 。用生物素结合羊抗人ige抗体(美国 ， vector ， 1∶100)对冰冻切片进行免疫组化染色 。步骤见文献［6］ 。计数与单抗反应的阳性细胞 。方法：c５型(0.5网形目镜r 5/10)显微镜用测微尺(上海第三光学仪器厂) ， 在酶标单抗阳性细胞数量最多部位的表皮或真皮内 ， 用高倍镜连续4个视野计测微尺内的酶标单抗阳性细胞数 ， 最后×4 ， 则为每mm２表皮内或真皮内酶标单抗阳性细胞数 。
二、结果
1.常规病理：季节性接触性皮炎和非季节性接触性皮炎常规病理无明显区别 。均见表皮细胞内外水肿 ， 真皮毛细血管扩张及炎性细胞浸润 。
2.免疫组化：5例季节性接触性皮炎花粉变应原斑试阳性过敏反应的组织中 ， 有4例在真皮内存在ige+细胞 。ige+细胞分别为36个/mm２、56个/mm２、3个/mm２和68个/mm2 。每mm２视野中 ， ige+细胞占浸润细胞数的百分比分别为3.2、4.8、0.3和5.6 。表皮内未见ige+细胞 。仅1例季节性接触性皮炎和7例非季节性接触性皮炎、2例正常对照在表皮和真皮内未检测到ige+细胞 。
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