图1 表皮生长因子对毛囊及毛干生长的影响
图2 egf对毛囊形态的影响.a培养第5天对照组毛囊形态,b培养第5天egf组毛囊形态,c培养第8天ecf组毛囊形态,同时可见贴壁生长的上皮细胞
图3 ecf对毛囊形态的影响 。a:对照组毛囊b:ecf组毛囊(×250)
(二)毛囊形态:倒置显微镜下观察,egf组毛囊形态在培养第1、2天未见明显改变,第4~6天出现退行期改变,毛干基底向上移,与毛乳头距离拉长,形成杵状发,与毛乳头间有一细胞索相连,第5天后部分毛囊下部出现弯折扭曲,并缩短 。外毛根鞘细胞常贴壁生长(见图2b和c) 。对照组毛囊直至培养第10天后才出现形态改变,未发现外毛根鞘细胞贴壁生长 。
组织学表现:培养第10天egf组示毛母质中黑素明显减少,毛囊下部外毛根鞘增厚,毛干基底杵状结构形成,并与毛乳头间拉开距离(见图3b) 。对照组毛囊结构清晰,毛母质包裹毛乳头,未见外毛根鞘增厚(见图3a) 。
(三)毛囊蛋白质合成:液闪计数仪计数,可溶于碱蛋白部分(毛囊上皮)放射性活性,egf组平均为370.00c/min,对照组平均为271.14c/min,两组差异有显著性(p<0.05),说明egf组毛囊上皮蛋白质的合成较对照组高;毛干蛋白部分放射性活性,egf组平均为173.19c/min,对照组平均为158.49c/min,两组差异无显著性 。
讨论
【表皮生长因子对游离毛囊生长的影响】 众多的生长因子中,egf倍受关注 。研究证明egf不仅在毛囊的形成和发育中有重要作用,还可能参与了毛发生长和生长周期的调节[1-3] 。利用免疫组织化学染色和放射自显影研究显示成熟的毛囊外毛根鞘(ors)内有egf和大量egf受体存在[2] 。也有实验显示egf可以诱导体外游离培养的人头皮毛囊或羊的毛囊发生类似于动物实验中羊毛的改变,使毛囊提前停止生长,进入退行期[3,4,7],而且使dna的合成模式发生变化,对外毛根鞘细胞的dna合成有明显的促进作用[3,7] 。
本实验中,形态学和组织学检查显示egf组毛囊提前发生退行期样改变,毛干基底和毛乳头的距离拉长,杵状发形成,毛囊下段发生弯折扭曲,部分毛囊下段缩短;而对照组未发生典型的退行期样改变 。这显示,毛囊的退行变和egf的作用是直接相关的 。因为egf受体主要位于毛囊的外毛根鞘内,故egf可能是与外毛根鞘细胞上的受体结合后,引起外毛根鞘细胞的生长、合成与分泌活动的变化,从而干扰毛囊的正常生长,导致退行变 。本实验结果中,egf组毛囊与对照组不同,毛囊的延长超过毛干的延长,毛囊上皮中蛋白质的合成明显多于对照组,说明egf对毛囊上皮成分有明显的促进作用,与文献相符 。但本实验未证明egf是否影响毛囊外毛根鞘细胞的合成、分泌等功能 。由于egf诱导体外培养毛囊的退行期改变与生理状态的退行期改变不完全相同,如看不到玻璃膜的增厚等,故毛发周期的调节是由egf和其他众多因素共同参与的复杂经过 。本实验说明egf促进毛囊的生长,主要是毛囊上皮细胞的生长,并能诱导毛囊提前由生长期进入退行期 。
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