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表皮生长因子对游离毛囊生长的影响

生活百科毛囊生长

通过毛囊器官培养观察表皮生长因子（egf）对人头皮毛囊生长的影响 。方法　用williamse无血清培养基进行人头皮毛囊游离培养，分为2组，egf组（43根）和对照组（43根） 。结果　egf20μg/l组在加药后1～3d毛干平均生长0.22mm/d，对照组平均生长0.16mm/d，两组差异有显著性（p＜0.05），egf对毛囊生长有更明显的促进作用 。但egf组毛囊于培养的第4～6天即出现退行期的形态改变并发生扭曲，毛干停止生长，对照组于培养第10天后才发生形态变化 。组织学上，培养第10天egf组毛囊下部外毛根鞘增厚，杵状结构形成，而对照组仍为生长期形态 。3h－亮氨酸掺入实验显示egf组毛囊上皮中的放射活性（370c/min）高于对照组（271.14c/min）(p＜0.05)，而毛干中的放射活性（173.19c/min）与对照组（158.49c/min）无明显差异 。结论　egf对毛囊的生长有促进作用，主要是促进毛囊上皮的生长，并且诱导毛囊提前由生长期进入退行期 。

表皮生长因子对游离毛囊生长的影响

文章插图

毛发生长周期的调节是一个复杂的生理生化过程，该过程尚不完全清楚 。现有的研究表明在毛囊的发生和生长过程中，表皮与间质间的相互作用是十分重要的，而这种相互作用可能是通过可弥散的分子，细胞与细胞间相互作用和细胞外基质介导的[1，2] 。表皮生长因子（egf）可能参与毛发生长与生长周期的调节[3，4] 。我们采用游离毛囊培养和3h－亮氨酸掺入实验探讨egf对人头皮毛囊的生长、形态和蛋白质合成的影响 。
材料和方法
(一)材料：
1.标本来源：18～35岁新鲜尸体头皮 。
2.仪器：解剖显微镜（北京泰克仪器有限公司），倒置显微镜（olympus），co2孵箱（queue） 。
3.培养基与试剂：williamse培养基（gibco）加谷氨酰胺2mmol/l，hepes2mmol/l，氢化可的松10μg/l，牛胰岛素（sigma）10mg/l，转铁蛋白（sigma）10mg/l，亚硒酸钠（北京朝阳中联化工试剂厂）10μg/l，青霉素10×104u/l，链霉素100mg/l 。egf(sigma)20μg/l 。
(二)方法：
1.毛囊器官培养：参照philpott[5]的方法 。选生长期毛囊分置于24孔板中，每孔1根，williamse无血清培养基中培养 。于培养第1天选取形态完好、生长速度与生理生长速度相似的毛囊（即1d内生长约0.3mm以上的毛囊）86根，分成两组：egf组和对照组各43根，egf组培养基中加入egf（20μg/l） 。每组各16根毛囊每天在倒置显微镜下观察毛囊形态并测量毛囊长度 。游离培养的毛囊两端的最远距离记为毛囊长度，从毛干基底到毛干游离端记为毛干长度 。
2.组织学检查：培养第10天，egf组和对照组各取2根毛囊，10％福尔马林固定24h，石蜡包埋，切片，he染色，观察毛囊组织学形态 。
3.3h－亮氨酸掺入：参照harmon[6]的方法，于加入egf培养24h后，egf组和对照组各选取25根毛囊，每5根置于1个孔中，加入3h－亮氨酸2μci/ml，继续培养48h后将毛囊移至1ml离心管中，分别用pbs和5％三氯醋酸（tca）洗2次，蒸馏水洗1次，然后加入1ml0.3nnaoh37℃孵化18h 。离心取上清液，测定可溶于碱蛋白（asp）部分，即毛囊上皮成分的放射活性 。沉淀主要为未溶解的毛干，用0.3nnaoh洗4次，然后与0.5mol/lnabh4＋1nnaoh50℃孵化48h，待毛干完全溶解，加入适量盐酸中和，用以测定毛干蛋白（hfp）中的放射活性 。使用液闪计数仪进行放射活性测定 。
5.统计学分析：采用spss统计软件进行t检验 。
结果
(一)毛囊生长情况：（图1）egf（20μg/l）组于加药后第1～3天毛干平均生长0.22mm/d，对照组平均生长0.16mm/d，两组比较差异有显著性（p＜0.05） 。egf组毛干第4天后生长速度明显减慢，第5天时61.5％停止生长，平均总生长天数为7.6d，而对照组直至第10天后还在继续生长，平均总生长天数为14d 。egf组毛囊和毛干的延长不完全一致，毛囊保持较快的延长速度至第6天，然后生长减慢，第8天时61.5％停止生长，平均生长天数为9.8d，培养10d总生长长度为1.28mm，比毛干（0.82mm）多（p＜0.05） 。而对照组毛囊与毛干的生长基本是一致的，培养第1～3天平均生长速度分别为0.15mm和0.16mm，培养10d平均总生长长度分别为0.96mm和1.02mm 。

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