用免疫印迹方法也可以检测抗ige自身抗体 。fiebiger将硝基苯乙酰与血清白蛋白的偶合物转印到膜上 , 使之与人抗硝基苯乙酰的基因工程ige抗体结合 , 然后加入待检血清进行检测 。
1.4 利用酶联免疫吸附实验 fiebiger报告的基于酶联免疫吸附实验的分析方法(elisa-based assay)主要是用来测定抗fcεr1自身抗体的[8] 。先用抗人ige的单克隆抗体吸附待检血清中的ige , 因为ige可以结合或封闭重组人高亲和力ige受体α链(rsfcεr1α)的表位 。而后 , 在液相条件下 , 让待检血清与生物素标记的rsfcεr1α37℃反应3h 。将反应体系加入到亲和素包被的反应板上 , 室温下孵育1h , 加入酶标二抗羊抗人igg抗体 , 最后加入底物 , 显色 , 测定比值 。如在待检血清与靶蛋白反应之前 , 加入一定浓度的重组靶蛋白 , 可以对反应结果进行精确的定量 。该方法测定自身抗体不需要电泳转膜 , 相对较为简便 , 它所识别的为非变性蛋白 。但该方法所测定的自身抗体与功能无关 , 即elisa阳性血清在体外不一定具有组胺释放能力 。
2 治疗研究进展
2.1 静脉注射免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin , ivig)ivig应用的免疫球蛋白是一种多价抗体 , 来源于正常人的血浆 , 它已成功地应用于对一些自身免疫性疾病的治疗 , 包括特发性血小板减少性紫癜和抗中性粒细胞胞浆抗体(anca)阳性的血管炎 。尽管其治疗机理尚不完全清楚 , 但它可能参与阻断iggfc段与受体的结合 , 抑制了对带有自身抗体血小板的破坏 。ivig也可能对抗独特型抗体网络有修饰作用 , 直接抑制b细胞和(或)t细胞的功能 。o’donnell[9]对10例慢性荨麻疹病人进行了治疗观察 , 该10例病人均为自身血清皮肤试验阳性及体外嗜碱粒细胞组胺释放试验阳性 , 并且临床症状严重 , 常规方法治疗效果不佳 。治疗的方法是病人住院治疗 , 静脉滴注免疫球蛋白0.4g/(kg.d) , 5天为1个疗程 , 第1天使用3%的浓度 , 随后4天用6%的生理盐水溶液静滴 。10例病人9例获得疗效:3例跟踪3年病情未复发 , 2例症状消失2个月后复发 , 继续治疗后症状又消失 , 其它4例症状缓解 。治疗后2周及6周的荨麻疹活动指数(urticaria activity scores)和直观模拟评分(visual analogue scores)均较治疗前有明显改善(p<0.01) 。荨麻疹活动指数的降低与治疗后荨麻疹病人自身血清皮肤试验的反应性降低相平行 。治疗期间所有的病人均有头痛 , 给予扑热息痛可获缓解 , 有部分病人有轻微的畏光、鼻塞、发热、静脉炎等 , 治疗后这些不良反应均自行消失 。肝肾功能未见异常 。ivig可以降低血清自身抗体的滴度 , 在抗ⅷ因子自身免疫性疾病 , ivig治疗后病人病情的改善归因于体内产生了抗自身抗体的独特型抗体 。对自身免疫性慢性荨麻疹 , 也可能产生独特型抗体 , 进而抑制了抗fcεr1自身抗体的组胺释放作用 。
【自身免疫性慢性荨麻疹的检测方法及治疗进展】 2.2 血浆透析gratten报道8例自身免疫性慢性荨麻疹病人 , 常规治疗不能缓解临床症状 , 给予血浆透析后 , 其中6例症状明显改善 , 或完全消失 , 另外2例症状只有轻微缓解 。自身血清皮肤试验显示 , 治疗后的血清比治疗前的血清反应性明显降低 , 体外嗜碱粒细胞脱颗粒试验也显示治疗后的血清较治疗前降低 。血浆透析可以做为一种对严重病例的辅助治疗措施 , 不宜单独使用[11] 。
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