聚合酶链反应检测单纯疱疹病毒糖蛋白G基因片段( 二 )

表1 生殖器疱疹不同类型标本细胞培养法与gg基因pcr法的阳性检出率比较
标本类型标本数细胞培养阳性数(%)pcr法*阳性数(%)p值早期皮疹拭子1716(94.1)14(82.4)0.301中晚期皮疹拭子235(21.7)12(52.2)0.033泌尿生殖道拭子4011(27.5)16(40.0)0.172 注:为gg基因pcr法
若以细胞培养法及hsvdna聚合酶基因pcr法为“扩大金标准” , 则hsvgg基因pcr法的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别为95.5%、100%、100%及94.7% 。
三、讨论
近年来流行病学调查发现部分地区生殖器hsv-ⅰ感染呈上升趋势[4] , 对生殖器疱疹的临床诊断只进行hsv-ⅱ检测 , 势必造成部分病例漏诊 。为此我们选择了hsvgg基因跨膜区编码区 , 设计了两条型特异性上游引物及一条型共同下游引物 , 一次可同时分型扩增检测hsv-ⅰ及hsv-ⅱdna 。扩增片段的长度相差一倍以上 , 结果易于判断 。对生殖器疱疹标本检测的结果表明 , gg基因pcr法不论在总体阳性率还是对生殖器疱疹中晚期皮疹标本的阳性检出率均显著高于细胞培养法(p值分别为0.005及0.033);与单克隆抗体间接免疫荧光试验的比较证实其分型结果可靠 , 并可同时分型检测hsv-ⅰ及hsv-ⅱ , 从而避免了hsv-ⅰ的漏检 , 具有一定的临床应用价值 。本文发现2份标本gg基因pcr法假阴性 , 对其细胞培养液再检测均阳性 , 排除了引物设计的影响;经hsvdna聚合酶基因pcr法再检测1例阳性 , 1例阴性;证实gg基因pcr法假阴性的原因可能为标本hsv滴度过低 , 超过了gg基因pcr法的最低检测极限 , 尚有待改进 。

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