抗中性粒细胞胞浆抗体(anca)是针对中性粒细胞和单核细胞胞浆蛋白的自身抗体 。该抗体被普遍认为是系统性血管炎的标记抗体 。间接免疫荧光法(iif)检测anca有3种荧光图谱 ， 胞浆型(c-anca)、核周型(p-anca)和非典型型(a-anca) 。为探讨anca与系统性红斑狼疮(sle)的关系及其临床意义 ， 我们采用iif法对63例sle患者血清进行检测 。
【系统性红斑狼疮患者抗中性粒细胞胞浆抗体的检测】
文章插图
一、材料与方法
1.对象:sle患者63例 ， 为本科住院患者 ， 年龄12～62岁 ， 平均30岁 ， 病程1个月至25年 ， 平均3.8年 。所有患者均符合美国风湿病协会1982年的诊断标准 。另选择42例正常健康人作为对照 。
2.anca检测:从正常献血员抗凝血中分离出中性粒细胞 ， 用细胞离心涂片机制备抗原片 ， 1000r/min离心4min ， 无水乙醇4℃固定5min ， 吹干 。标本血清用0.01mol/lpbs1∶10稀释加在抗原片上 ， 37℃孵育30min ， pbs洗3次 ， 每次5min ， 吹干 。加1滴羊抗人igg荧光抗体(军事医学科学院提供 ， 用时1∶40稀释)于抗原片上 ， 同上37℃孵育30min ， pbs洗3次 ， 吹干 。加缓冲甘油封片 ， 荧光显微镜下观察结果 。中性粒细胞胞浆出现特异性荧光者为c-anca ， 细胞核周围出现特异性荧光者为p-anca ， 不典型荧光着色者为a-anca ， 胞浆及核周围均无特异荧光染色者为阴性 。每例标本均进行2次以上检测证实 。
3.抗核抗体(ana)检测:以小鼠肝切片为底物 ， 采用iif 。抗dsdna抗体采用放射免疫分析法检测 。抗ena抗体采用对流免疫电泳法检测 。
4.统计学处理:采用χ2检验 。
二、结果
1.42份正常健康人血清均为阴性 ， 63例sle患者血清26例anca阳性(41.3％) ， 其中p-anca15例 ， a-anca11例 。
2.在anca阳性组 ， 浆膜炎及多系统受累的sle患者明显高于阴性组 ， 而肝损害、肺部病变、皮损及心电图异常在两组之间没有差异(见表1) 。抗dsdna抗体阳性及中度以上贫血(血红蛋白＜90g/l)的sle患者在anca阳性组明显高于阴性组(见表2) 。
表1 anca与sle临床表现的关系[例数(％)]
临床表现anca阳性(26例)anca阴性(37例)χ2值p值蝶形红斑13(50.0)16(43.2)0.281＞0.05盘状红斑及紫癜19(73.1)25(67.6)0.220＞0.05口腔溃疡11(42.3)17(45.9)0.082＞0.05腹水4(15.4)5(13.5)0.044＞0.05浆膜炎13(50.0)6(16.2)8.274＜0.01心电图异常6(23.1)14(37.8)1.534＞0.05肺部病变4(15.4)5(13.5)0.044＞0.05肝脏损害6(23.1)3(8.1)2.794＞0.05多系统受累14(53.8)9(24.3)5.741＜0.05 表2 anca与sle其它实验室检查的关系[例数(％)]
实验室检查anca阳性(26例)anca阴性(37例)χ2值p值24h蛋白尿＞0.15g/l22(84.6)30(81.1)0.132＞0.05血小板＜100×109/l5(19.2)8(21.6)0.053＞0.05白细胞＜4.0×109/l10(38.5)15(40.5)0.028＞0.05血红蛋白＜110g/l21(80.8)22(59.5)3.200＞0.05＜90g/l12(46.2)8(21.6)4.241＜0.05血沉＞20mm/lh22(84.6)31(83.8)0.008＞0.05ana阳性26(100)33(89.2)3.000＞0.05坑ds-dna抗体阳性10/108/17(47.1)7.941＜0.01抗sm/抗阳性5(19.2)11(29.7)0.888＞0.05抗ssa/抗ssb阳性10(38.5)20(54.1)1.488＞0.05 三、讨论
debandt等[1]在11例sle患者血清中检测出1例p-anca ， 4例a-anca 。lawton和lee[2]在46例sle患者中检测出14例p-anca 。而我们在63例sle患者中发现15例p-anca ， 11例a-anca 。在sle患者血清中未见有c-anca的报道 。这些不同的荧光图型是由多种抗原成分所致 。c-anca的主要抗原成分为蛋白酶3(pr3) ， p-anca的主要抗原成分为髓过氧化物酶(mpo) ， a-anca的抗原成分目前尚不清楚 。afelera等[3]的研究发现 ， 抗中性粒细胞胞浆抗原和核抗原的免疫应答不同 ， 本文结果也未发现ana与anca有相关性 。
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