二步聚合酶链反应检测皮肤T细胞淋巴瘤的T细胞受体基因重排

应用二步聚合酶链反应(pcr)检测皮肤t细胞淋巴瘤(ctcl)的t细胞受体(tcr)基因重排,提高其准确性和特异性,并应用已知重排的cdna序列,推测该病患者的特异肽链顺序,为免疫治疗提供新线索和途径 。
【二步聚合酶链反应检测皮肤T细胞淋巴瘤的T细胞受体基因重排】

二步聚合酶链反应检测皮肤T细胞淋巴瘤的T细胞受体基因重排

文章插图
方法 先用tcr基因重排区域以外的部分为引物,做10~30个循环扩增 。取得一定数量的cdna,作为模板,再经30~40个循环扩增,获得较纯的cdna 。然后将此产物放入质粒,进一步分析dna序列 。按照分析结果,制备出特异的分子探针,对二步pcr扩增产物进行分子杂交,推测出患者的特异性肽链顺序 。结果 以vβ8为特殊引物所显示的反应带明显,用vβ8顺序制成的分子探针杂交,示明显的特异性结合 。特异性分子探针只与ctcl患者的cdna杂交,与对照组标本不发生交叉反应 。结论 二步pcr可准确地检测ctcl的tcr基因重排,其特异性强,并可在此基础上应用已知重排的cdna序列推测该病患者的特异性肽链,为免疫治疗提供新线索和途径 。

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