1、常用微生物染色的方法革兰染色
抗酸染色:分支杆菌属,诺卡放线菌属 。石炭酸复红染色,金永染色 。
芽孢染色:用于区分细菌的芽孢和营养细胞 。结果芽孢染成绿色,营养细胞为红色 。
晶体染色:观察苏云金杆菌不同变种的晶体形状大小 。结果晶体染成紫色,芽孢为透明椭圆形,仅见具有轮廓的折光体 。
鞭毛染色:有赖夫生染色法、银盐染色法,西萨-基尔染色法等 。一般以西萨-基尔(Cesares-Gill)染法效果最佳 。
异染颗粒染色:用于白喉棒状杆菌染色,直接涂片或改良阿伯特法染色 。
墨汁荚膜染色:观察菌体有无荚膜,如新型隐球菌 。碳素墨汁 。
镀银染色:螺旋体
吉姆萨染色:螺旋体
荧光染色
魏申染色(wayson)染色:鼠疫耶尔森杆菌 。
铬酸P、A、S真菌类染色 。结果:曲霉菌、念球菌属、细胞浆菌属、隐球菌属为红紫色 。曲霉菌丝周边紫红色,弹力纤维紫色,背景绿色 。
Mann氏甲基蓝伊红染色法:病毒包涵体染色 。Negri氏小体红色 。
Nacchiavello氏染色:病毒包涵体染色 。结果:包涵体、立克次氏体均染红色,其余组织呈蓝色 。
Crocott-Gomori氏六胺银法:新型隐球菌
碘染色法吉姆萨染色:衣原体
乳酸酚棉蓝染色,糖原染色:真菌,前者适用于所有真菌,呈蓝色 。
吉姆萨染色,瑞氏染色:鞭毛虫,滴虫,锥虫,疟原虫,弓形虫,隐孢子虫等原虫 。
三色染色,碘染色:阿米巴等原虫 。
荧光素吖啶橙染色:疟原虫 。
金胺-酚染色:隐孢子虫 。
甲苯胺蓝,四胺银染色:耶氏肺孢子虫 。
检验常用染色法包括 1）革兰氏染色法 2）抗酸染色法 3）美兰染色法 4）异染颗粒染色法 5）细菌鞭毛染色法 6）荚膜染色法芽孢染色法 7)布氏杆菌科兹洛夫斯基染色法 8)结核杆菌荧光染色法等主要染色法 革兰氏染色法染液配制 1 。结晶紫染液：称取结晶紫（龙胆紫）14g，溶于95%酒精100ml中，配成饱和液，再取饱和液20ml与1%草酸铵溶液（1g草酸铵溶于100ml蒸馏水溶解即成）80ml混匀即成2 。卢戈氏碘液：碘化钾2g于10ml蒸馏水中，再加碘1g，待碘全部溶解后（时间较长）加蒸馏水200ml即成3 。95%酒精4 。（1）石碳酸复红液：称取碱性复红（碱性品红）4g溶于95%酒精100ml中成饱和液 ， 再取饱和液10ml与5%石碳酸溶液（5ml石碳酸溶于100ml蒸馏水）90ml混匀即成，（2）稀释石碳酸复红液：取石碳酸复红液10ml加入蒸馏水90ml即成染色方法：1 。涂片 将菌液直接涂在载玻片上，经培养的菌落要加生理盐水混匀涂片，等待干燥（固定）2 。将结晶紫染液滴加在已固定的涂片上，染色1分钟后用水冲去剩余燃料3 。滴加卢戈氏碘液1分钟后水洗，在滴加95%酒精脱色 ， 摇动玻片至紫色不在脱色为止（约需1分钟），水洗4 。用稀释石碳酸复红液复染30秒至1分钟5 。水洗待干，镜检6 。革兰氏阳性菌染成紫色，革兰氏阴性菌染成红色
文章插图
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2、革兰氏染色法的有关问题1.分别找两种已知的G+和G-菌，用完全一致的手段对其操作染色，若镜检结果与已知事实相符，则此时可认为染色操作是正确的，结果是可靠的 。
2.分离成单个菌体、在培养基中培养成菌斑，涂板、染色、显微镜就可以找到染色体非常清晰的染色菌体！3. 一般设置一个对照
即取一株生长健壮 ， 且已知其革兰氏染色反应的菌株，与待检测的菌株一同染色 ， 染色时间、染液量一致 。染色后一同做镜鉴 。
一般G+选枯草芽孢杆菌，G-取大肠杆菌 4.
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