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银屑病患者血清中细胞间粘附分子的检测

生活百科银屑病

近年研究发现细胞间粘附分子(icam-1)在银屑病发病中有一定作用［1～4］，为此，我们采用elisa法对34例银屑病患者血清可溶性icam-1(sicam-1)水平进行了测定，并对部分患者外周血单一核细胞(pbmc)icam-1表达进行了研究，现将结果报道如下 。

银屑病患者血清中细胞间粘附分子的检测

文章插图

一、病例和方法
【银屑病患者血清中细胞间粘附分子的检测】 (一)检测对象：取自1996年9月至1997年3月我科门诊及住院的银屑病患者，共34例，其中男22例，女12例；年龄14～52岁，平均36岁；病程6天至24年；其中进行期寻常型银屑病16例，静止期寻常型银屑病15例，红皮病型银屑病2例，脓疱型银屑病1例 。皮损程度计算按照pasi积分法［5］，病例选择3周内(红皮病型除外)未系统或大面积外用过皮质类固醇激素、免疫抑制剂及维胺脂类等药物的患者 。正常对照组33例，为门诊体检筛选出的正常人(24例)及科内健康工作者(9例)，性别及年龄尽量与检测患者相同或相近 。
(二)试剂：sicam-1试剂盒为medgenix公司产品，apaap试剂盒为军事医学科学院基础所产品，鼠抗人icam-1单克隆抗体为zymed公司产品，购自北京中山试剂公司 。
(三)方法：
1.血清sicam-1测定：抽静脉血2ml，分离血清，置于-40℃备用待测，所有患者及对照组均是同步测定，采用双抗体夹心elisa法，将标准品、血清样品及空白(生理盐水)加入96孔酶板中，每孔25μl，均为复孔，每孔再加入75μl辣根过氧化物酶标记的单抗，20℃振荡 孵育2小时，弃去孔内液体，每孔加入洗涤液400μl，重复洗涤3次，之后每孔加入显色液200μl，20℃振荡 孵育30分钟，最后每孔加入50μl 1.8n h２so４终止反应，置芬兰labsysterms酶标仪450nm及650nm(双波长法)处测各孔吸光度(a值)，绘制标准曲线，从中求得sicam-1含量(单位：ng/ml) 。
2.pbmc icam-1染色：患者组为15例，对照组16例，抽静脉血后密度梯度离心，常规分离pbmc，离心涂片机涂片，采用apaap法，最后于显微镜下计数300个有核细胞，然后统计出每百个有核细胞阳性细胞数(pbmc icam-1+%) 。
3.统计学处理：采用spss软件包进行t检验及相关分析 。
二、结果
1.银屑病患者血清sicam-1水平及pbmc icam-1+%结果见附表 。进行期血清sicam-1水平(258.7±153.6ng/ml)
附表　银屑病患者血清sicam-1水平
及pbmc icam-1+%结果
组别sicam-1 pbmc icam-1+%例数±s(ng/ml)例数±s(%)银屑病组34232.2±66.21520.0±7.4对 照 组33185.0±42.11612.0±3.9t值-2.56-1.72p值-＜0.01-＜0.05
与静止期(178.5±32.7ng/ml)比较，t=2.63，p＜0.01，两组间有显著性差异，静止期与对照组比较无显著性差异(p＞0.05)，2例红皮病型和1例脓疱型银屑病患者血清sicam-1水平分别为387.6、364.5及428.3ng/ml 。
2.血清sicam-1水平与pasi的关系经相关分析，r=0.56，p＜0.01，两者之间有显著的正相关关系 。
三、讨论
icam-1是一种单链糖蛋白，与白细胞表面的lfa-1和mac-1互为配体，主要分布于成纤维细胞、上皮样细胞及血管内皮细胞表面［1～3］，其主要作用是介导多种细胞间的相互粘附，在炎症和免疫反应中有一定的作用［1］，sicam-1是细胞膜表面的icam-1“脱落”进入血清而形成的，正常人血清中sicam-1水平约100～200ng/ml 。griffiths等［4］报道银屑病患者血清sicam-1增高，我们测定的结果显示34例银屑病患者血清sicam-1水平与对照组比较明显增高(p＜0.01)，患者组pbmc icam-1+%与对照组比较明显增高 。由于sicam-1的主要生物学作用是与细胞膜icam-1竞争性结合白细胞膜表面的相应配体［1，2］，而血管内皮细胞表面可表达icam-1［1～4］，所以我们推测银屑病患者血清中增高的sicam-1可能通过血管内皮icam-1竞争性地结合白细胞膜上的lfa-1和mac-1，从而对中性粒细胞与内皮细胞粘连以及通过血管壁具有抑制作用 。推测sicam-1在银屑病进行期可能具有一定的保护作用，即抑制白细胞与血管内皮细胞粘附 。

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