系统性红斑狼疮患者白介素8和肿瘤坏死因子α水平的检测

【系统性红斑狼疮患者白介素8和肿瘤坏死因子α水平的检测】 我们应用酶联免疫吸附法(elisa法)检测了系统性红斑狼疮(sle)患者血清中的白介素8(il-8)及肿瘤坏死因子α(tnfα)含量,同时采用免疫组化技术对患者皮损和非皮损区的il-8进行了观察 。现将结果报道如下 。

系统性红斑狼疮患者白介素8和肿瘤坏死因子α水平的检测

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一、资料和方法
(一)病例选择: sle患者55例,均符合美国风湿病协会1982年诊断标准 。活动期与稳定期sle的判断参照陈家福等[1]采用的标准 。其中活动期sle患者32例,男4例,女28例;年龄16~55岁(30.18±13.79岁) 。稳定期sle患者23例,均为有活动病史,治疗后病情稳定的患者(泼尼松40~80mg/d,治疗4周至16个月,症状大多消失),男2例,女21例;年龄18~54岁(33.16±12.79岁) 。采静脉血,取分离后的血清,置-23℃待检 。对其中12例患者(活动期、稳定期各6例)取不同部位皮损和非皮损处皮损,10%甲醛液固定,石蜡包埋,常规切片厚5μm 。对照组血清取自30例正常人,男5例,女25例;年龄20~52岁(31.27±16.32岁) 。外科手术的正常皮肤10份 。
(二)方法:①双抗体夹心elisa法:il-8试剂盒购自军事医学科学院北京邦定医学生物公司 。tnfα试剂盒购自解放军总医院东亚免疫技术研究所 。实验严格按试剂盒说明书进行 。待检血清-23℃冰箱冻存,同批测定 。②免疫组化法:切片常规脱蜡、水化;甲醇-h2o2液封闭内源性过氧化酶 。滴加兔抗il-8单抗,湿盒内室温1h;pbs冲洗3次,每次5min;滴加猪抗兔酶标抗体,湿盒内室温30min;dab显色,苏木素复染,脱水透明,中性树胶封片,光镜观察 。
(三)统计学处理:实验数据以±s表示,采用两样本均数的t检验进行统计学分析 。

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