近几年来的研究已证实 ， 宫颈癌的发生与人乳头瘤病毒(hpv)、人巨细胞病毒(hcmv)和ⅱ型单纯疱疹病毒(hsv-ⅱ)感染有关 。为了解尖锐湿疣(ca)患者中hcmv和hsv-ⅱ感染的流行情况 ， 探讨其性传播可能性 ， 我们采用pcr技术对85例ca患者和156例一般孕妇进行宫颈hcmv和hsv-ⅱ感染的检测 ， 并进行了比较观察 ， 报道如下 。
文章插图
【尖锐湿疣患者宫颈人巨细胞病毒和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染的检测】 一、临床资料
1.实验组：85例女性ca患者为我院1994年5月至1996年5月性病门诊患者 ， 临床诊断和病理诊断确诊为ca ， 年龄15～41岁 ， 平均22.4±5.1岁；病程半个月至2年 ， 平均2.8±2.5年 。发病部位：大小阴唇、阴道口、宫颈及肛门周围处 。患者本人或配偶有非婚性接触史81例(95.3%) ， 其中每月性伴数≥5个的ca患者31例 ， 否认有非婚性接触史4例(4.7%) 。选择hpv6b、hpv11型共用引物 ， 采用pcr技术检测ca组织中hpv dna ， hpv dna阳性79例(92.9%) ， hpv dna阴性6例(7.1%) 。既往性病史：有性病史者46例(54.1%) ， 其中3例有生殖器疱疹史 ， 无性病史者39例(45.9%) 。
2.对照组：156例来我室进行torch优生检测的一般孕妇 ， 年龄23～35岁 ， 平均26.5±3.1岁 ， 既往无性病史和非婚性接触史 。
二、实验方法
1.模板dna制备：用无菌棉拭子采集宫颈分泌物置于hanks液中 ， 4℃ 16000r/min ， 离心30分钟 ， 弃上清 ， 沉淀用1×pcr缓冲液(含0.45% np-40、0.45%吐温20、蛋白酶k 300mg/l)混匀 ， 55℃水浴过夜 ， 煮沸10分钟 ， 冰浴后离心弃沉淀 ， 上清用于pcr扩增模板 。
2.寡核苷酸引物的设计：根据已公布的病毒基因组序列设计并合成寡核苷酸引物序列 ， hcmv引物序列为5′-tgggcatcgactgacgagca-3′、5′-tttagcagtctgcatagcct-3′ ， 扩增片段为151个碱基对；hsv-ⅱ引物序列为5′-atggtgaacatcgacatgtacgg-3′、5′-cctccttgtcgaggccccgaaac-3′ ， 扩增片段为391个碱基对 。
3.pcr扩增反应和电泳检测：操作按作者前文［1］方法进行 。
4.统计学处理：用χ2检验 。
三、结果
1.实验组85例ca患者中26例hcmv dna阳性 ， 阳性率为30.6%；9例hsv-ⅱ dna阳性 ， 阳性率为10.6%；对照组156例一般孕妇中11例hcmv dna阳性 ， 阳性率为7.1%；1例hsv-ⅱ dna阳性 ， 阳性率为0.6% 。
2.实验组中31例每月性伴数≥5个的ca患者 ， hcmv dna阳性率为51.6%(16/31) ， hsv-ⅱ dna阳性率19.4%(6/31)；而其它ca患者hcmv dna阳性率18.5%(10/54) ， hsv-ⅱ dna阳性率5.6%(3/54) 。46例曾患过性病的ca患者 ， hcmv dna阳性率为45.7%(21/46) ， hsv-ⅱ dna阳性率为15.2%(7/46)；而无性病史的ca患者hcmv dna阳性率为12.8%(5/39) ， hsv-ⅱ dna阳性率为5.1%(2/39) 。
四、讨论
在我们的调查中 ， ca患者宫颈hcmv感染率(30.6%)高于一般孕妇hcmv感染率(7.1%) ， ca患者宫颈中hsv-ⅱ感染(10.6%)高于一般孕妇hsv-ⅱ感染率(0.6%) ， ca患者与一般孕妇比较hsv-ⅱ、hcmv感染率有显著性差异(p＜0.01) 。每月性伴数≥5个的ca患者较一般ca患者易患hcmv和hsv-ⅱ感染(p＜0.01) ， 既往有性病史的ca患者较无性病史者易患hcmv和hsv-ⅱ感染(p＜0.01) ， 提示性伴数和既往性病史是hcmv和hsv-ⅱ发病率增高的危险因素 ， 非婚性接触是hcmv和hsv-ⅱ的重要传播途径 。
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